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~M~A~N~U~A~L~D~E~Tt~C~N~I~C~AS~H~E~LM~~~=LóG~I~C~A~S~V~tffi~R~IN~A~R~I~A~S_____________________________________________________________ 23
Diagnóstico de microfilarias en sangre.
(Rodríguez el al., 1987)
Método directo
1. Extráiganse unas cuantas gotas de sangre del animal
sospechoso mediante punción venosa o por un pequeño corte
con un bisturí en la oreja o cara interior del labio.
2. Colóquese la sangre sobre un porta-objeto.
3. Examínese mediante el objetivo de pequeño aumento para
investigar la presencia de las microfil arias móviles. las
mismas que producengran agitación en las células hemáticas.
Otra técnica uti lizada es la siguie nte:
1. Extráigase por punción venosa una buena cantidad de sangre.
2. Déjese coagular.
3. Examínese el suero sobrenadante.
El segu ndo método es superior al primero, ya que las
microfilarias se enc uentran en mayor concentración en el suero
que en la sangre total.
Uno y otro, no obstante, son limitados a causa de la cantidad
reducida de sangre o suero que puede examinarse.
Otra técnica, superior a las anteriores. es la de concentración
y debe utilizarse siempre que sea posible.
Método de concentración.
(Rodríguez el al., 1987)
1. Extráigase de 5 a 10 mi de sangre por punción venosa.
2. Colóquese en un rubo de ensayo que cuente con tapón y déjese
coagular. preferiblemente en plano inclinado.
La retracción del coágulo puede ser acelerada si se mantiene
la muestra en incubación (+37°C).
3. Decántese el suero de la muestra e n un tubo de ensayo.
4. Llénese el resto del tubo con ácido acético al 2 ó 5% o bien
ácido clorhídrico al I ó 2%. Inviértase el tubo tapado varias
veces con el fin de mezclar el contenido.
S. Centrifúguese a 226 G ( 1. 500 rpm) por espacio de 5 mino
6. Viénaseel líquido sobrenadante del tubo hasta dejar solamente
una o dos gotas (el sedimento quedará adherido firmeme nte
al fondo del tubo y no se despegará de él. aunq ue se invierta
por completo el tubo).
7. Agítese el tubo y vierta el sedimento. sobre un porta-objetos y
examínese median te el objetivo seco de pequeño aumento
sin cubre-objetos.
La preparación debe contener leucocitos y fragmentos de
eritroc itos. Las mic rofi larias suelen a parecer como larvas
vennifonnes carentes de vida.
Debe utilizarse iluminación de poca inte nsidad, debido a que
este parásito es casi transparente. Se aportará la il uminación hasla
que los leucocitos se vean opacos.
Diagnóstico de Trichinella spiralis
(Asoc. Me•. Parasil. Vel., 1984)
Para el diag nóstico de este he lminto se recurre muy
frecuentemente a la observación de la muestra de tejido en el
triquinoscopio, de la siguiente manera:
• Si no se cuenta con un triquinoscopio (dos vidrios atornillados
de fonna que puedan apretarse O no de acuerdo al interés) se
puede utilizar dos vidrios unidos mediante faja elástica o
c ualquier malerial que les ¡, .... mita la compresión del tejido
diafragmático que se incluye e ntre ambos.
• Se oprime el tejido y se observa bajo el microscopio con me nor
aumento hasta observar las larvas de T. spiralis enquistadas.