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MANUAL DE TÉCNICAS HELMlNTOLÓGICAS VETERINARIAS
Para la conservación de nemátodos de cutícula gruesa, es
preferible utilizar líquidos calientes. El alcohol al 70% o la
solución de fonnalina del 3 al 5% deben calentarse entre 7 10 a
82°C, tras lavar intensamente los parásitos, agitándolos en 2 o 3
cambios de suero fisiológico. deben introducirse en el fij ador
caliente. Una vez que el líquido se ha enfriado, se separan los
proglotides y el fijador usado se guarda para usarlo poste–
riormente.
Conservación y montaje de tremátodos y céstodos
Luego de obtenidos los ejemplares pueden ser mantenidos
en suero fisiológico o agua a 4°C hasta por 24 horas.
Para la conservación, se secan y colocan cuidadosamente
varios ejemplares. lo más estirados posibles, entre portaobjetos
y cubreobjeto, atados fuertemente con hilo de coser y se sumergen
en un recipiente cerrado con solución de alcohol, formol y ácido
acético, por unos minutos.
Para el montaje de platelmintos, es necesario teñir los
ejemplares, para ello la solución más efecti va es la de carmín
(ver preparación de soluciones).
Los ejemplares son li berados de la compresión entre porta y
cubreobjetos, cortardo el hilo, al levantar el cubreobjetos
generalmente quedan adheridos al portaobjetos que se introduce
en la caja de Petri con el colorante para iniciar el proceso de
tinción:
• Se introduce en el colorante carmín durante 24 horas.
• Se pasa luego por alcohol 70 durante 5 minutos.
• Se introduce en la solución de alcohol ácido hasta ver (mediante
el estéreo o lupa) que se aclara la cutícula y se observa la
morfología interna.
• Se pasa nuevamente al alcohol 70 durante 5 a 10 minutos, para
quitar colorante.
• Se coloca el portaobjetos en otra placa con alcohol 70 durante
24 horas para tenninar de lavar.
• Se coloca en alcohol 96 durante 24 horas.
• Se pasa más tarde al alcohol absoluto por 24 horas.
• Se le añade a los ejemplares 2 o 3 gotas de carboxylol y se
mantienen durante 5 a 10 minutos, se seca con papel filtro y
se montan los ejemplares en Bálsamo de Canadá o resina
sintética; estas preparaciones permanecen por 2 ó 3 días.
En caso de céstodos (de cut ícul a fi na o gruesa), es
recomendable la tinción de Blachín, luego de separar los escólex
y mantener éstos en alcohol, formol y ácido acético. El proceso
de tinción es como se describe a continuación:
• Introduzca los ejemplares en el colorante, los fi nos duran te 3
horas y los gruesos durante 24 horas.
• Lave en agua corriente hasta que el agua circulante en el
ejemplar se observe sin residuos de colorante.
• Coloque entre portaobjetos y cubreobjeto, atando ambos,
procurando estirar los parásitos.
• Introduzca en alcohol 70 durante 24 horas.
• Se conti núa la mi sma me todo logía que se describió
anteriormente.
En caso de que los ejemplares queden muy teñidos, se pasan
por decolorante hasta obtener el contraste deseado.
Luego de mantener los escólex en solución alcohol, fOllTlol
y ácido acético por 24 horas, se pasa por los alcoholes y se mon tan
con Bálsamo de Canadá o resi na sintética.
Conservación y montaje de acantoceplralos
Se sigue el mismo procesamiento que con los nemátodos.
Examen macroscópico de las heces utilizando el
método de tamizaje.
El examen de las heces a simple vis ta proporciona cierta
orientación para el diagnóstico parasito lógico. Las heces de
consistencia más fluida, suelta y pastosa que lo normal en los
distintos animales, penniten suponer la ex istencia de una
enfermedad parasitaria, el cambio de co lo r constituye
igualmente un signo diagnóstico preliminar en el caso de los
estrongylidos. La causa más frecue nte de esta anomalía es la
hemorragia, cuando ésta se produce en el último tramo de l
canal d igestivo, los excrementos son de color rojo bri ll an te
fácilmente reconocibles, muy disti nto es el aspecto de las
heces cuando la hemo rragia se produce en los primeros
segmentos de l tu bo intestinal, en este caso resultan más
oscuras y de olor fétido. Algunas enfe rmedades parasitarias,
anquilostomiasis por ejemplo, pueden evidenciarse de esta
forma.
En las heces se pueden advertir frecuememente a simple
vista ciertos parásitos como larvas de dípteros de l genero
Gasterophilu s, progloti des de teni as y ot ros helmin tos
intestinales (Ascaris. Oxyuris, Trichocephallls, etcétera). Debe
hacerse constar que las fonnas halladas en las he¡,;es no siempre
son de naturaleza paras itaria, por ejemplo. residuos ali mentic io~
(tallos de plantas, etcétera); en la mayoría de los casos se
difere ncian con fac il idad de los estad íos de parásitos.
El diagnóstico parasitológico no sólo se debe basar en la
identificación de los helmintos expulsados del cuerpo, como
consecuencia de los purgantes y antihelmínticos ;.¡dmin istrados
con el fin de combatir la enfermedad parasitaria .
Método de tamil.aje
Puede resul tar úti l para la observac ión de helm intos o
fragmentos de ellos expulsados en las heces. Se sigue el siguicme
método:
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